A是一种正在哺乳动物细胞中富厚的RNA点缀，由甲基迁徙酶复合体(MTC)催化，此中METTL3/METTL14异二聚体是MTC的催化亚基。商量注明，mA甲基化通过调控RNA的转录天生、剪接、不变性及翻译正在多种心理和病理进程中施展紧急效用。而mA仍然被揭示与多种组卵白点缀(如H3K36me3、H3K9me3、H3K27me3、H3K27ac等）之间存正在干系。MTC能够富集正在H3K27ac染色质上鼓吹eRNA和paRNA的mA点缀，进而影响基因转录。然而，目前尚不显露该进程是怎样被调控的。其余，MTC的催化亚基METTL3/METTL14异二聚体的解聚是怎样被调控的也不显露，这一进程是否能够到场eRNA和paRNA的m

　　商量者通过全基因组CRISPR/Cas9筛选联结TETon-BIFC申诉体例正在A549细胞中体例性占定出一系列METTL3/METTL14异二聚体解聚的调控因子。进一步，通过免疫共浸淀、3D-SIM、高通量质谱等工夫阐知道METTL3正在H3K27ac染色质的定位依赖于其与METTL14的联络，而乙酰化酶p300通过介导METTL3的K177、K215、K578氨基酸位点发作乙酰化点缀，进而遏抑METTL3与METTL14的联络，使得METTL3不行定位于H3K27ac染色质。PAK2通过磷酸化METTL3的S243氨基酸位点，鼓吹了p300介导的METTL3乙酰化，从而到场该调控进程。而且，商量者还采用了真迈生物SURFSeq 5000平成了野生型METTL3及METTL3-3KR突变（模仿去乙酰化）的A549细胞的CUT&Tag测序尝试，正在基因组水准验证了METTL3的乙酰化对付其正在H3K27ac染色质定位的遏抑效用。

　　进一步，商量者发掘这些m6A点缀上调的eRNA和paRNA的干系基因明显富集于铁弃世调控合系通途，如：氧化还原酶活性、不饱和脂肪酸代谢进程、类固醇代谢进程和NRF2通途。因而，METTL3-3KR突变导致这些铁弃世遏抑基因的表达下调，进而鼓吹铁弃世诱导剂惹起的细胞弃世和脂质过氧化。其余，PAK2遏抑剂也可能通过METTL3乙酰化依赖的格式鼓吹铁弃世诱导剂惹起的细胞弃世。终末，商量者通过TCGA数据揭示了PAK2正在METTL3高表达的肺癌、肝癌、结直肠癌等肿瘤中影响患者的预后。

　　GLORI(Glyoxal and nitrite-mediated deamination of unmethylated adenosine)乙二醛和亚硝酸盐介导的非甲基化腺苷（A）脱氨基测序工夫是针对m6A点缀开拓的单碱基检测工夫。达成了真正意旨的高效劳、高机警度、高特异性、无偏好单碱基m6A位点检测，并对m6A位点的点缀水准举行绝对定量，也是RNA的m6A检测的主流NGS伎俩。其工夫道理如下图所示：

　　最先提取总RNA，举行片断化，片断化的产品颠末乙二醛和亚硝酸盐处分，RNA正在乙二醛和亚硝酸盐的催化系统来有用地将未甲基化的腺苷（Adenosine)脱氨基转换成变成肌苷（Inosine,I），肌苷I正在逆转录进程中与胞苷(Cytidine）配对，正在测序进程中被读作鸟苷（Guanosine），但m6A维系稳定，测序后仍读为A。因而，GLORI通过检测测序序列中A的比例达成了单碱基区别。